Question
click below
click below
Question
Normal Size Small Size show me how
Wirowanie
Question | Answer |
---|---|
Czym jest wirowanie? | Metoda, przy użyciu której można rozdzielić mieszaninę cząstek, komórek itp. zawieszonych w cieczy na składniki różniące się gęstością w polu siły odśrodkowej. |
Jakie siły działają na cząsteczkę podczas wirowania? | Siła odśrodkowa bezwładności - F0, siła wyporu Fw i siłą tarcia Ft |
Od czego zależy siła odśrodkowa? | Od masy cząsteczki, prędkości kątowej i promienia obrotu. |
Od czego zależy siła wyporu? | Od gęstości cząsteczki, |
Czym jest siła tarcia? | Jeżeli cząstka porusza się z prędkością v wzdłuż promienia obrotu, to działa na nią siła tarcia o zwrocie przeciwnym do prędkości. |
Od czego zależy prędkość ruchu cząstki w polu siły odśrodkowej? | Od jej odległości od osi obrotu r, prędkości kątowej, lepkości cieczy oraz gęstości cząstki i cieczy. |
Czym jest RCF? | Relative Centrifuge Force. Parametr wirowania, który definiowany jest przez wielokrotność siły ciężkości. |
Prawo Archimedesa | Na ciało całkowicie lub częściowo zanurzone w cieczy (lub gazie) działa siła wyporu Fw. Jest ona skierowana pionowo do góry, a jej wartość jest równa ciężarowi cieczy (lub gazu) wypartego przez to ciało. |
Prawo (NIE ZASADA) Stokesa | Prawo, opisujące siłę oporu Ft towarzyszącą jednostajnemu ruchowi ciała zanurzonego w lepkim płynie. Siła o zwrocie przeciwnym do zwrotu prędkości ciała, ma wartość F=6πηru, |
Czym jest η? | Współczynnik lepkości dynamicznej cieczy/ośrodka. |
Czym jest u? | Szybkość opadania (prędkość ruchu ciała względem cieczy) |
Od czego zależy tarcie podczas wirowania? | Od lepkości ośrodka, od wielkości cząstki i od prędkości cząstki. |
Czym jest lepkość? | Tzw. tarcie wewnętrzne - zdolność płynu do przekazywania pędu pomiędzy warstwami poruszającymi się z różnymi prędkościami. |
Prawo Newtona | Wprowadza pojęcie tarcia wewnętrznego między poruszającymi się względem siebie sąsiadującymi warstwami płynu. Miarą wielkości tego tarcia jest lepkość płynu. |
Czym jest dyfuzja? | Rozprzestrzenianie się cząsteczek w gazie lub cieczy wywołany stałym ich ruchem kinetycznym spowodowane różnicą stężeń cząsteczek w różnych częściach roztworu. Dyfuzja zachodzi zgodnie z gradientem stężeń i nie wymaga dostarczenia energii. |
O czym mówi Prawo Ficka? | Szybkość dyfuzji to ilość gramów substancji rozproszonej przeniesiona przez granicę zetknięcia w jednostce czasu jest proporcjonalna do gradientu stężenia oraz do powierzchni zetknięcia A. |
Czym jest współczynnik dyfuzji? | Masa substancji rozpuszczonej, która przedyfunduje przez powierzchnię 1 cm2 w ciągu 1s pod wpływem gradientu stężenia równego 1g / cm3. |
Czym jest równanie Einsteina-Smoluchowskiego? | Równanie opisujące współczynnik D. |
Od czego zależy współczynnik dyfuzji D? | Od wielkości i kształtu cząsteczki. |
Czym jest osmoza? | Przechodzenie cząsteczek wody (lub innego rozpuszczalnika) przez błonę półprzepuszczalną (biologiczną lub sztuczną). |
Czym jest ciśnienie osmotyczne? | Takie ciśnienie hydrostatyczne panujące w naczyniu z roztworem (oddzielonym od czystego rozpuszczalnika błoną półprzepuszczalną), aby rozpuszczalnik nie wnikał do roztworu. |
Od czego zależy ciśnienie osmotyczne? | Od stężenia niezależnych elementów w roztworze. |
Czym jest sedymentacja? | Opadanie cząsteczek w roztworze, spowodowane przyciąganiem ziemskim lub wytworzoną sztucznie siłą odśrodkową. |
Co jest niezbędne, aby spowodować sedymentację cząsteczek w r-rze? | Siła odśrodkowa powinna przewiększać przeciwnie skierowaną siłę dyfuzji (siłę tarcia+siłę wyporu). |
Czym jest współczynnik sedymentacji? | Współczynnik charaktyzujący sedymentację danej cząsteczki w określonym ośrodku. |
Od czego zależy współczynnik sedymentacji S? | Stężenia cząstek w ośrodku, lepkości ośrodka, gęstości ośrodka, temperatury. |
Czym jest stała sedymentacji S20,w? | S wyznaczony w warunkach standardowych, czyli: ośrodkiem jest woda, temperatura ma temp 20°C, gdzie stężenie cząsteczek jest ekstrapolowane do 0. |
Ile wynosi stała sedymentacji S20,w? | 10^-13 = 1S = 1 Svedberg |
Typy rotorów | Horyzontalny, kątowy, pionowy, strefowy, hematokrytowy, przepływowy. |
Rotor horyzontalny | Kuwety na probówki są uchylne, a podczas wirowania ustawiają się wraz z probówkami pod kątem 90° do osi obrotu (w poziomie). |
Rotor kątowy | Próbówki nie zmieniają swojego położenia i są ustawione do osi obrotu pod innym kątem niż 90° (najczęściej 30 lub 45) |
Jakie parametry należy określić podczas wirowania? | Czas, temperaturę, RCF |
Zasady podczas wirowania | Masa probówek powinna być równa po przeciwległych stronach osi obrotu, nie wolno otwierać pokrywy przed zakończeniem wirowania, probówki muszą być odpowiednio trwałe, probówki muszą być wypełnione min. w połowie max 3/4. |
Jak można podzielić wirówki ze względu na uzyskiwane częstości obrotów? | Niskoobrotowe, średnioobrotowe, ultrawirówki. |
Jak można podzielić wirówki ze względu na przeznaczenie? | Preparatywne, analityczne, inne (np, hematokrytowe) |
Czym różnią się wirówki analityczne od innych wirówek? | Mają układ analizowania przemieszczania się cząstek podczas wirowania. |
Czym charakteryzują się ultrawirówki? | Ultrawirówki mają układ wytwarzający próżnię, układ chłodzący, analityczne mają wbudowany układ optyczny, osiągają przyspieszenia aż do 10^6g. |
Jakie rotory są stosowane w ultrawirówkach? | Kątowe, horyzontalne, analityczne |
Na czym polega określanie mas cząsteczkowych metodą szybkości sedymentacji? | Podczas wirowania cz. o małych masach powstają dwie strefy: strefa czystego rozpuszczalnika i (2) roztworu. Pomiędzy znajduje się początkowo ostra granica ulegająca rozmyciu . Metoda ta opiera się na pomiarze szybkości przemieszczania się tej granicy. |
Na czym polega oznaczanie masy molowej metodą równowagi sedymentacyjnej? | Metoda ta opiera się na zjawisku tworzenia się równowagi sedymentacyjnej przy stosunkowo niewielkich rpm. |
Jakie są warunki wirowania podczas metody szybkości sedymentacji? | Fodś >> Fdyf . RPM bardzo duże - 10.000 obr/min |
Jakie są warunki wirowania podczas metody równowagi sedymentacyjnej? | Vsed równoważona jest z Fdyf. |
Jaka metoda wirownicza jest najdokładniejszą metodą wyznaczania masy molowej? | Metoda równowagi sedymentacyjnej. |
Jaki jest przebieg oznaczania masy molowej metodą równowagi sedymentacyjnej? | Po ustaleniu się równowagi pomiędzy sedymentacją a dyfuzją w kuwecie widoczny jest (skierowany w dół) gradient stężeń cząsteczek. Następuje pomiar stężenia cząsteczek w dwóch położeniach. |
Jakie metody ultrawirownicze stosowane są to wyznaczania masy molowej? | Metoda równowagi sedymentacyjnej i metoda szybkości sedymentacji. |
Jakie jest zastosowanie technik ultrawirowania? | Analiza homogenności preparatu, oznaczanie masy molowej, analiza tworzenia kompleksów makromolekuł, analiza wiązania ligandów do akceptorów, wyznaczanie współczynnika sedymentacji i współczynnika dyfuzji. |
Jakie warunki muszą spełniać substancje służące do przygotowania gradientów gęstości? | Dobra rozpuszczalność, niska lepkość, izoosmotyczny w stosunku do organelli wirowanych, łatwa sterylizacja, łatwy do usunięcia, brak aktywności biologicznej w stosunku do cząsteczek, czystość. |
Jakie substancje są używane do przygotowywania gradientów gęstości? | Sacharoza, glicerol, sorbitol, mannitol, perkol, sole nieorganiczne jak chlorek cezu. |
Od czego zależy prędkość przemieszczania się cząsteczki podczas wirowania różnicowego? | Masy cz., objętości cz., kształtu cz., właściwości ośrodka, temperatury. |
Co jest podstawą rozdziału podczas wirowania różnicowego? | Różnice w S poszczególnych cząsteczek. |
Jak zachowują się cząsteczki w roztworach izotonicznych? | Zachowują kształt, objętość i gęstość. |
Jak zachowują się cząsteczki w roztworach hipotonicznych? | Pęcznieją i pękają. |
Jak zachowują się w roztworach hipertonicznych? | Kurczą się. |
Co jest podstawą rozdziału podczas wirowania w gradiencie gęstości? | Fakt, że cząstki nie różnią się tylko S lecz także qcz. |
Rodzaje gradientów | Liniowy, skokowy |
W jakich rotorach przeprowadza się wirowanie w gradiencie gęstości? | Horyzontalnych, pionowych, strefowych. |
W jakich metodach wykorzystuje się gradient gęstości? | Metoda szybkości sedymentacji, metoda wirowania izopyknicznego. |
Na czym polega metoda wirowania izopyknicznego? | Gradient powoduje rozdział cząsteczek na podstawie ich gęstości. Cząsteczki o wędrują do strefy o gęstości równej ich własnej. |
Jaka jest gęstość ośrodka podczas metody szybkości sedymentacji? | Mniejsza od gęstości cząsteczki. |
Jaka jest gęstość ośrodka podczas metody wirowania izopyknicznego? | Na dnie probówki jest większa od gęstości cząsteczki |
Jaka jest podstawowa zasada wirowania w gradiencie gęstości? | Początkowy współczynnik sedymentacji S zmienia się w trakcie wirowania w gradiencie gęstości, zmieniając szybkość sedymentacji v. |
Jakie składniki komórki uzyskamy przy małych prędkościach? | Całe komórki, jądra |
Jakie składniki komórki uzyskamy przy średnich prędkościach? | Mitochondria, lizosomy, peroksysomy |
Jakie składniki komórki uzyskamy przy dużych prędkościach? | Mikrosomy |
Jakie składniki komórki uzyskamy przy ultradużych prędkościach? | Rybosomy, wirusy |